ససవ

లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ కాలమ్‌ను ఎలా ఎంచుకోవాలో ఈ కథనం మీకు బోధిస్తుంది

 

లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ అనేది ముడి పదార్థాలు, మధ్యవర్తులు, సన్నాహాలు మరియు ప్యాకేజింగ్ మెటీరియల్‌లలోని ప్రతి భాగం మరియు మలినాలను పరీక్షించడానికి ప్రధాన పద్ధతి, కానీ అనేక పదార్థాలపై ఆధారపడటానికి ప్రామాణిక పద్ధతులు లేవు, కాబట్టి కొత్త పద్ధతులను అభివృద్ధి చేయడం అనివార్యం. లిక్విడ్ ఫేజ్ పద్ధతుల అభివృద్ధిలో, క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్ అనేది లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క ప్రధాన అంశం, కాబట్టి తగిన క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్‌ను ఎలా ఎంచుకోవాలి అనేది కీలకం. ఈ వ్యాసంలో, రచయిత మూడు అంశాల నుండి లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ కాలమ్‌ను ఎలా ఎంచుకోవాలో వివరిస్తారు: మొత్తం ఆలోచనలు, పరిశీలనలు మరియు అప్లికేషన్ స్కోప్.

 

A.లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ నిలువు వరుసలను ఎంచుకోవడానికి మొత్తం ఆలోచనలు

 

1. విశ్లేషణ యొక్క భౌతిక మరియు రసాయన లక్షణాలను మూల్యాంకనం చేయండి: రసాయన నిర్మాణం, ద్రావణీయత, స్థిరత్వం (ఇది ఆక్సీకరణం చేయడం/తగ్గించడం/జలవిశ్లేషణ చేయడం సులభం కాదా లేదా వంటిది), ఆమ్లత్వం మరియు క్షారత మొదలైనవి, ముఖ్యంగా రసాయన నిర్మాణం కీలకం. సంయోగ సమూహం బలమైన అతినీలలోహిత శోషణ మరియు బలమైన ఫ్లోరోసెన్స్ వంటి లక్షణాలను నిర్ణయించే అంశం;

 

2. విశ్లేషణ యొక్క ఉద్దేశ్యాన్ని నిర్ణయించండి: అధిక విభజన, అధిక కాలమ్ సామర్థ్యం, ​​చిన్న విశ్లేషణ సమయం, అధిక సున్నితత్వం, అధిక పీడన నిరోధకత, సుదీర్ఘ కాలమ్ జీవితం, తక్కువ ధర మొదలైనవి అవసరమా;

 

  1. తగిన క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్‌ను ఎంచుకోండి: కణ పరిమాణం, రంధ్రాల పరిమాణం, ఉష్ణోగ్రత సహనం, pH సహనం, విశ్లేషణ యొక్క అధిశోషణం మొదలైన క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పూరకం యొక్క కూర్పు, భౌతిక మరియు రసాయన లక్షణాలను అర్థం చేసుకోండి.

 

  1. లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ నిలువు వరుసలను ఎంచుకోవడానికి సంబంధించిన అంశాలు

 

క్రోమాటోగ్రఫీ కాలమ్ యొక్క భౌతిక మరియు రసాయన లక్షణాల దృక్కోణం నుండి క్రోమాటోగ్రఫీ కాలమ్‌ను ఎంచుకున్నప్పుడు పరిగణించవలసిన అంశాలను ఈ అధ్యాయం చర్చిస్తుంది. 2.1 పూరక మాతృక

2.1.1 సిలికా జెల్ మ్యాట్రిక్స్ చాలా లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ నిలువు వరుసల పూరక మాతృక సిలికా జెల్. ఈ రకమైన పూరక అధిక స్వచ్ఛత, తక్కువ ధర, అధిక యాంత్రిక బలం కలిగి ఉంటుంది మరియు సమూహాలను సవరించడం సులభం (ఫినైల్ బంధం, అమైనో బంధం, సైనో బంధం మొదలైనవి), అయితే ఇది తట్టుకోగల pH విలువ మరియు ఉష్ణోగ్రత పరిధి పరిమితం: చాలా సిలికా జెల్ మ్యాట్రిక్స్ ఫిల్లర్ల యొక్క pH పరిధి 2 నుండి 8 వరకు ఉంటుంది, అయితే ప్రత్యేకంగా సవరించబడిన సిలికా జెల్ బాండెడ్ ఫేజ్‌ల యొక్క pH పరిధి 1.5 నుండి 10 వరకు విస్తృతంగా ఉంటుంది మరియు తక్కువ pH వద్ద స్థిరంగా ఉండే ప్రత్యేకంగా సవరించిన సిలికా జెల్ బంధిత దశలు కూడా ఉన్నాయి. ఎజిలెంట్ ZORBAX RRHD స్టేబుల్‌బాండ్-C18 వంటివి, ఇది pH 1 నుండి 8 వరకు స్థిరంగా ఉంటుంది; సిలికా జెల్ మాతృక యొక్క ఎగువ ఉష్ణోగ్రత పరిమితి సాధారణంగా 60 ℃, మరియు కొన్ని క్రోమాటోగ్రఫీ నిలువు వరుసలు అధిక pH వద్ద 40 ℃ ఉష్ణోగ్రతను తట్టుకోగలవు.

2.1.2 పాలిమర్ మ్యాట్రిక్స్ పాలిమర్ ఫిల్లర్లు ఎక్కువగా పాలీస్టైరిన్-డివినైల్బెంజీన్ లేదా పాలీమెథాక్రిలేట్. వాటి ప్రయోజనాలు ఏమిటంటే అవి విస్తృత pH పరిధిని తట్టుకోగలవు - అవి 1 నుండి 14 పరిధిలో ఉపయోగించబడతాయి మరియు అవి అధిక ఉష్ణోగ్రతలకు (80 °C కంటే ఎక్కువ చేరుకోగలవు) మరింత నిరోధకతను కలిగి ఉంటాయి. సిలికా-ఆధారిత C18 ఫిల్లర్‌లతో పోలిస్తే, ఈ రకమైన పూరకం బలమైన హైడ్రోఫోబిసిటీని కలిగి ఉంటుంది మరియు ప్రోటీన్‌ల వంటి నమూనాలను వేరు చేయడంలో మాక్రోపోరస్ పాలిమర్ చాలా ప్రభావవంతంగా ఉంటుంది. సిలికా ఆధారిత ఫిల్లర్ల కంటే కాలమ్ సామర్థ్యం తక్కువగా ఉండటం మరియు మెకానికల్ బలం బలహీనంగా ఉండటం దీని ప్రతికూలతలు. 2.2 కణ ఆకారం

 

చాలా ఆధునిక HPLC ఫిల్లర్లు గోళాకార కణాలు, కానీ కొన్నిసార్లు అవి క్రమరహిత కణాలు. గోళాకార కణాలు తక్కువ కాలమ్ ఒత్తిడి, అధిక కాలమ్ సామర్థ్యం, ​​స్థిరత్వం మరియు సుదీర్ఘ జీవితాన్ని అందించగలవు; అధిక-స్నిగ్ధత మొబైల్ దశలను ఉపయోగిస్తున్నప్పుడు (ఫాస్పోరిక్ ఆమ్లం వంటివి) లేదా నమూనా ద్రావణం జిగటగా ఉన్నప్పుడు, క్రమరహిత కణాలు పెద్ద నిర్దిష్ట ఉపరితల వైశాల్యాన్ని కలిగి ఉంటాయి, ఇది రెండు దశల పూర్తి చర్యకు మరింత అనుకూలంగా ఉంటుంది మరియు ధర సాపేక్షంగా తక్కువగా ఉంటుంది. 2.3 కణ పరిమాణం

 

చిన్న కణ పరిమాణం, అధిక కాలమ్ సామర్థ్యం మరియు అధిక విభజన, కానీ అధ్వాన్నంగా అధిక పీడన నిరోధకత. అత్యంత సాధారణంగా ఉపయోగించే కాలమ్ 5 μm కణ పరిమాణం కాలమ్; విభజన అవసరం ఎక్కువగా ఉన్నట్లయితే, 1.5-3 μm పూరకాన్ని ఎంచుకోవచ్చు, ఇది కొన్ని సంక్లిష్ట మాతృక మరియు బహుళ-భాగాల నమూనాల విభజన సమస్యను పరిష్కరించడానికి అనుకూలంగా ఉంటుంది. UPLC 1.5 μm పూరకాలను ఉపయోగించవచ్చు; 10 μm లేదా పెద్ద కణ పరిమాణం పూరకాలను తరచుగా సెమీ ప్రిపరేటివ్ లేదా ప్రిపరేటివ్ కాలమ్‌ల కోసం ఉపయోగిస్తారు. 2.4 కార్బన్ కంటెంట్

 

కార్బన్ కంటెంట్ అనేది సిలికా జెల్ యొక్క ఉపరితలంపై బంధిత దశ యొక్క నిష్పత్తిని సూచిస్తుంది, ఇది నిర్దిష్ట ఉపరితల వైశాల్యం మరియు బంధిత దశ కవరేజీకి సంబంధించినది. అధిక కార్బన్ కంటెంట్ అధిక కాలమ్ కెపాసిటీ మరియు అధిక రిజల్యూషన్‌ను అందిస్తుంది మరియు అధిక విభజన అవసరమయ్యే సంక్లిష్ట నమూనాల కోసం తరచుగా ఉపయోగించబడుతుంది, అయితే రెండు దశల మధ్య సుదీర్ఘ పరస్పర చర్య కారణంగా, విశ్లేషణ సమయం చాలా ఎక్కువ; తక్కువ కార్బన్ కంటెంట్ క్రోమాటోగ్రాఫిక్ నిలువు వరుసలు తక్కువ విశ్లేషణ సమయాన్ని కలిగి ఉంటాయి మరియు విభిన్న ఎంపికలను చూపగలవు మరియు వేగవంతమైన విశ్లేషణ మరియు అధిక సజల దశ పరిస్థితులు అవసరమయ్యే నమూనాలను అవసరమైన సాధారణ నమూనాల కోసం తరచుగా ఉపయోగిస్తారు. సాధారణంగా, C18 యొక్క కార్బన్ కంటెంట్ 7% నుండి 19% వరకు ఉంటుంది. 2.5 రంధ్రాల పరిమాణం మరియు నిర్దిష్ట ఉపరితల వైశాల్యం

 

HPLC అధిశోషణ మాధ్యమం పోరస్ కణాలు, మరియు చాలా పరస్పర చర్యలు రంధ్రాలలో జరుగుతాయి. అందువల్ల, అణువులు శోషించబడటానికి మరియు వేరు చేయబడటానికి రంధ్రాలలోకి ప్రవేశించాలి.

 

రంధ్రాల పరిమాణం మరియు నిర్దిష్ట ఉపరితల వైశాల్యం రెండు పరిపూరకరమైన అంశాలు. చిన్న రంధ్రాల పరిమాణం అంటే పెద్ద నిర్దిష్ట ఉపరితల వైశాల్యం మరియు దీనికి విరుద్ధంగా. ఒక పెద్ద నిర్దిష్ట ఉపరితల వైశాల్యం నమూనా అణువులు మరియు బంధిత దశల మధ్య పరస్పర చర్యను పెంచుతుంది, నిలుపుదలని పెంచుతుంది, నమూనా లోడింగ్ మరియు కాలమ్ సామర్థ్యాన్ని పెంచుతుంది మరియు సంక్లిష్ట భాగాలను వేరు చేస్తుంది. పూర్తిగా పోరస్ ఫిల్లర్లు ఈ రకమైన పూరకాలకు చెందినవి. అధిక విభజన అవసరాలు ఉన్నవారికి, పెద్ద నిర్దిష్ట ఉపరితల వైశాల్యంతో పూరకాలను ఎంచుకోవాలని సిఫార్సు చేయబడింది; చిన్న నిర్దిష్ట ఉపరితల వైశాల్యం వెనుక ఒత్తిడిని తగ్గిస్తుంది, కాలమ్ సామర్థ్యాన్ని మెరుగుపరుస్తుంది మరియు సమతౌల్య సమయాన్ని తగ్గిస్తుంది, ఇది ప్రవణత విశ్లేషణకు అనుకూలంగా ఉంటుంది. కోర్-షెల్ ఫిల్లర్లు ఈ రకమైన పూరకాలకు చెందినవి. విభజనను నిర్ధారించే ఆవరణలో, అధిక విశ్లేషణ సామర్థ్య అవసరాలు ఉన్నవారికి చిన్న నిర్దిష్ట ఉపరితల వైశాల్యంతో పూరకాలను ఎంచుకోవాలని సిఫార్సు చేయబడింది. 2.6 పోర్ వాల్యూమ్ మరియు మెకానికల్ బలం

 

పోర్ వాల్యూమ్, "పోర్ వాల్యూమ్" అని కూడా పిలుస్తారు, ఇది యూనిట్ కణానికి శూన్య వాల్యూమ్ యొక్క పరిమాణాన్ని సూచిస్తుంది. ఇది ఫిల్లర్ యొక్క యాంత్రిక బలాన్ని బాగా ప్రతిబింబిస్తుంది. పెద్ద పోర్ వాల్యూమ్ ఉన్న ఫిల్లర్ల యొక్క యాంత్రిక బలం చిన్న రంధ్ర పరిమాణం కలిగిన ఫిల్లర్ల కంటే కొంచెం బలహీనంగా ఉంటుంది. 1.5 mL/g కంటే తక్కువ లేదా సమానమైన పోర్ వాల్యూమ్ ఉన్న పూరకాలను ఎక్కువగా HPLC వేరు చేయడానికి ఉపయోగిస్తారు, అయితే 1.5 mL/g కంటే ఎక్కువ పోర్ వాల్యూమ్ ఉన్న ఫిల్లర్లు ప్రధానంగా మాలిక్యులర్ ఎక్స్‌క్లూజన్ క్రోమాటోగ్రఫీ మరియు తక్కువ-పీడన క్రోమాటోగ్రఫీ కోసం ఉపయోగిస్తారు. 2.7 క్యాపింగ్ రేటు

 

క్యాపింగ్ సమ్మేళనాలు మరియు బహిర్గతమైన సిలానాల్ సమూహాల మధ్య పరస్పర చర్య వలన ఏర్పడే టైలింగ్ శిఖరాలను తగ్గిస్తుంది (ఆల్కలీన్ సమ్మేళనాలు మరియు సిలానాల్ సమూహాల మధ్య అయానిక్ బంధం, వాన్ డెర్ వాల్స్ శక్తులు మరియు ఆమ్ల సమ్మేళనాలు మరియు సిలానాల్ సమూహాల మధ్య హైడ్రోజన్ బంధాలు వంటివి), తద్వారా కాలమ్ సామర్థ్యం మరియు గరిష్ట ఆకృతిని మెరుగుపరుస్తుంది. . అన్‌క్యాప్డ్ బాండెడ్ ఫేజ్‌లు క్యాప్డ్ బాండెడ్ ఫేజ్‌లకు సంబంధించి విభిన్న ఎంపికలను ఉత్పత్తి చేస్తాయి, ప్రత్యేకించి ధ్రువ నమూనాల కోసం.

 

 

  1. వివిధ లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ నిలువు వరుసల అప్లికేషన్ పరిధి

 

ఈ అధ్యాయం కొన్ని సందర్భాల్లో వివిధ రకాల లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ కాలమ్‌ల అప్లికేషన్ పరిధిని వివరిస్తుంది.

3.1 రివర్స్డ్-ఫేజ్ C18 క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్

 

C18 నిలువు వరుస అనేది సాధారణంగా ఉపయోగించే రివర్స్డ్-ఫేజ్ కాలమ్, ఇది చాలా సేంద్రీయ పదార్ధాల యొక్క కంటెంట్ మరియు అశుద్ధ పరీక్షలకు అనుగుణంగా ఉంటుంది మరియు మధ్యస్థ-ధ్రువ, బలహీన ధ్రువ మరియు నాన్-పోలార్ పదార్థాలకు వర్తిస్తుంది. నిర్దిష్ట విభజన అవసరాలకు అనుగుణంగా C18 క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్ రకం మరియు స్పెసిఫికేషన్ ఎంచుకోబడాలి. ఉదాహరణకు, అధిక విభజన అవసరాలు కలిగిన పదార్ధాల కోసం, 5 μm*4.6 mm*250 mm స్పెసిఫికేషన్‌లు తరచుగా ఉపయోగించబడతాయి; సంక్లిష్ట విభజన మాత్రికలు మరియు సారూప్య ధ్రువణత కలిగిన పదార్ధాల కోసం, 4 μm*4.6 mm*250 mm స్పెసిఫికేషన్‌లు లేదా చిన్న కణ పరిమాణాలను ఉపయోగించవచ్చు. ఉదాహరణకు, సెలెకాక్సిబ్ APIలో రెండు జెనోటాక్సిక్ మలినాలను గుర్తించడానికి రచయిత 3 μm*4.6 mm*250 mm కాలమ్‌ని ఉపయోగించారు. రెండు పదార్ధాల విభజన 2.9 కి చేరుకుంటుంది, ఇది అద్భుతమైనది. అదనంగా, విభజనను నిర్ధారించే ఆవరణలో, వేగవంతమైన విశ్లేషణ అవసరమైతే, 10 mm లేదా 15 mm యొక్క చిన్న కాలమ్ తరచుగా ఎంపిక చేయబడుతుంది. ఉదాహరణకు, పైపెరాక్విన్ ఫాస్ఫేట్ APIలో జెనోటాక్సిక్ అశుద్ధతను గుర్తించడానికి రచయిత LC-MS/MSని ఉపయోగించినప్పుడు, 3 μm*2.1 mm*100 mm కాలమ్ ఉపయోగించబడింది. అశుద్ధత మరియు ప్రధాన భాగం మధ్య విభజన 2.0, మరియు నమూనాను గుర్తించడం 5 నిమిషాల్లో పూర్తి అవుతుంది. 3.2 రివర్స్డ్-ఫేజ్ ఫినైల్ కాలమ్

 

ఫినైల్ కాలమ్ కూడా ఒక రకమైన రివర్స్డ్-ఫేజ్ కాలమ్. ఈ రకమైన కాలమ్ సుగంధ సమ్మేళనాల కోసం బలమైన ఎంపికను కలిగి ఉంటుంది. సాధారణ C18 కాలమ్ ద్వారా కొలవబడిన సుగంధ సమ్మేళనాల ప్రతిస్పందన బలహీనంగా ఉంటే, మీరు ఫినైల్ కాలమ్‌ను భర్తీ చేయడాన్ని పరిగణించవచ్చు. ఉదాహరణకు, నేను సెలెకాక్సిబ్ APIని తయారు చేస్తున్నప్పుడు, అదే తయారీదారు యొక్క ఫినైల్ కాలమ్ మరియు అదే స్పెసిఫికేషన్ (మొత్తం 5 μm*4.6 mm*250 mm) ద్వారా కొలవబడిన ప్రధాన భాగం ప్రతిస్పందన C18 నిలువు వరుస కంటే దాదాపు 7 రెట్లు ఎక్కువ. 3.3 సాధారణ-దశ కాలమ్

 

రివర్స్డ్-ఫేజ్ కాలమ్‌కు సమర్థవంతమైన అనుబంధంగా, సాధారణ-దశ కాలమ్ అధిక ధ్రువ సమ్మేళనాలకు అనుకూలంగా ఉంటుంది. రివర్స్డ్-ఫేజ్ కాలమ్‌లో 90% కంటే ఎక్కువ సజల ఫేజ్‌తో ఎల్యూట్ చేస్తున్నప్పుడు శిఖరం ఇప్పటికీ చాలా వేగంగా ఉంటే మరియు ద్రావకం పీక్‌కు దగ్గరగా మరియు అతివ్యాప్తి చెందితే, మీరు సాధారణ-దశ కాలమ్‌ను భర్తీ చేయడాన్ని పరిగణించవచ్చు. ఈ రకమైన కాలమ్‌లో హిలిక్ కాలమ్, అమినో కాలమ్, సైనో కాలమ్ మొదలైనవి ఉంటాయి.

3.3.1 హిలిక్ కాలమ్ హిలిక్ కాలమ్ సాధారణంగా ధ్రువ పదార్థాలకు ప్రతిస్పందనను మెరుగుపరచడానికి బంధిత ఆల్కైల్ చైన్‌లో హైడ్రోఫిలిక్ సమూహాలను పొందుపరుస్తుంది. ఈ రకమైన కాలమ్ చక్కెర పదార్ధాల విశ్లేషణకు అనుకూలంగా ఉంటుంది. xylose మరియు దాని ఉత్పన్నాల యొక్క కంటెంట్ మరియు సంబంధిత పదార్ధాలను చేసేటప్పుడు రచయిత ఈ రకమైన నిలువు వరుసను ఉపయోగించారు. xylose ఉత్పన్నం యొక్క ఐసోమర్‌లను కూడా బాగా వేరు చేయవచ్చు;

3.3.2 అమైనో కాలమ్ మరియు సైనో కాలమ్ అమినో కాలమ్ మరియు సైనో కాలమ్ ప్రత్యేక పదార్ధాల ఎంపికను మెరుగుపరచడానికి వరుసగా బంధిత ఆల్కైల్ గొలుసు చివరిలో అమైనో మరియు సైనో మార్పులను ప్రవేశపెట్టడాన్ని సూచిస్తాయి: ఉదాహరణకు, అమైనో కాలమ్ మంచి ఎంపిక. చక్కెరలు, అమైనో ఆమ్లాలు, స్థావరాలు మరియు అమైడ్ల విభజన కోసం; సంయోగ బంధాల ఉనికి కారణంగా హైడ్రోజనేటెడ్ మరియు అన్‌హైడ్రోజనేటెడ్ స్ట్రక్చరల్ సారూప్య పదార్థాలను వేరు చేసేటప్పుడు సైనో కాలమ్ మెరుగైన ఎంపికను కలిగి ఉంటుంది. అమైనో కాలమ్ మరియు సైనో కాలమ్ తరచుగా సాధారణ ఫేజ్ కాలమ్ మరియు రివర్స్ ఫేజ్ కాలమ్ మధ్య మారవచ్చు, కానీ తరచుగా మారడం సిఫారసు చేయబడలేదు. 3.4 చిరల్ కాలమ్

 

చిరల్ కాలమ్, పేరు సూచించినట్లుగా, చిరల్ సమ్మేళనాల విభజన మరియు విశ్లేషణకు, ముఖ్యంగా ఫార్మాస్యూటికల్స్ రంగంలో అనుకూలంగా ఉంటుంది. సాంప్రదాయిక రివర్స్ ఫేజ్ మరియు సాధారణ దశ నిలువు వరుసలు ఐసోమర్‌ల విభజనను సాధించలేనప్పుడు ఈ రకమైన నిలువు వరుసను పరిగణించవచ్చు. ఉదాహరణకు, రచయిత 5 μm*4.6 మిమీ*250 మిమీ చిరల్ కాలమ్‌ని 1,2-డిఫెనైల్‌థైలెనెడియమైన్ యొక్క రెండు ఐసోమర్‌లను వేరు చేయడానికి ఉపయోగించారు: (1S, 2S)-1, 2-డిఫెనిలెథైలెన్‌డైమిన్ మరియు (1R, 2R)-1, 2 -డిఫెనైల్‌థైలెనెడియమైన్, మరియు రెండింటి మధ్య విభజన దాదాపు 2.0కి చేరుకుంది. అయినప్పటికీ, చిరల్ నిలువు వరుసలు ఇతర రకాల నిలువు వరుసల కంటే ఖరీదైనవి, సాధారణంగా 1W+/పీస్. అటువంటి నిలువు వరుసల అవసరం ఉన్నట్లయితే, యూనిట్ తగినంత బడ్జెట్ను తయారు చేయాలి. 3.5 అయాన్ మార్పిడి కాలమ్

 

అయాన్లు, ప్రోటీన్లు, న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలు మరియు కొన్ని చక్కెర పదార్ధాలు వంటి చార్జ్డ్ అయాన్ల విభజన మరియు విశ్లేషణ కోసం అయాన్ మార్పిడి నిలువు వరుసలు అనుకూలంగా ఉంటాయి. పూరక రకం ప్రకారం, అవి కేషన్ ఎక్స్ఛేంజ్ నిలువు వరుసలు, అయాన్ మార్పిడి నిలువు వరుసలు మరియు బలమైన కేషన్ మార్పిడి నిలువు వరుసలుగా విభజించబడ్డాయి.

 

కేషన్ మార్పిడి స్తంభాలలో కాల్షియం-ఆధారిత మరియు హైడ్రోజన్-ఆధారిత నిలువు వరుసలు ఉన్నాయి, ఇవి అమైనో ఆమ్లాల వంటి కాటినిక్ పదార్ధాల విశ్లేషణకు ప్రధానంగా అనుకూలంగా ఉంటాయి. ఉదాహరణకు, కాల్షియం గ్లూకోనేట్ మరియు కాల్షియం అసిటేట్‌లను ఫ్లషింగ్ ద్రావణంలో విశ్లేషించేటప్పుడు రచయిత కాల్షియం ఆధారిత నిలువు వరుసలను ఉపయోగించారు. రెండు పదార్ధాలు λ=210nm వద్ద బలమైన ప్రతిస్పందనలను కలిగి ఉన్నాయి మరియు విభజన డిగ్రీ 3.0కి చేరుకుంది; గ్లూకోజ్-సంబంధిత పదార్థాలను విశ్లేషించేటప్పుడు రచయిత హైడ్రోజన్-ఆధారిత నిలువు వరుసలను ఉపయోగించారు. అనేక ప్రధాన సంబంధిత పదార్థాలు - మాల్టోస్, మాల్టోట్రియోస్ మరియు ఫ్రక్టోజ్ - అవకలన డిటెక్టర్‌ల క్రింద అధిక సున్నితత్వాన్ని కలిగి ఉంటాయి, గుర్తించే పరిమితి 0.5 ppm కంటే తక్కువగా ఉంటుంది మరియు విభజన డిగ్రీ 2.0-2.5.

సేంద్రీయ ఆమ్లాలు మరియు హాలోజన్ అయాన్లు వంటి అయోనిక్ పదార్ధాల విశ్లేషణకు అయాన్ మార్పిడి నిలువు వరుసలు ప్రధానంగా అనుకూలంగా ఉంటాయి; బలమైన కేషన్ మార్పిడి నిలువు వరుసలు అధిక అయాన్ మార్పిడి సామర్థ్యం మరియు ఎంపికను కలిగి ఉంటాయి మరియు సంక్లిష్ట నమూనాల విభజన మరియు విశ్లేషణకు అనుకూలంగా ఉంటాయి.

పైన పేర్కొన్నది రచయిత యొక్క స్వంత అనుభవంతో కలిపి అనేక సాధారణ లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ నిలువు వరుసల రకాలు మరియు అప్లికేషన్ పరిధుల పరిచయం మాత్రమే. పెద్ద-రంధ్రాల క్రోమాటోగ్రాఫిక్ నిలువు వరుసలు, చిన్న-రంధ్రాల క్రోమాటోగ్రాఫిక్ నిలువు వరుసలు, అనుబంధ క్రోమాటోగ్రఫీ నిలువు వరుసలు, మల్టీమోడ్ క్రోమాటోగ్రాఫిక్ నిలువు వరుసలు, అల్ట్రా-హై పెర్ఫార్మెన్స్ లిక్విడ్ క్రోమటోగ్రఫీ కాలమ్‌లు (UHPLC), సూపర్ క్రిటికల్ ఫ్లూయిడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ కాలమ్‌లు (సూపర్‌క్రిటికల్ ఫ్లూయిడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ) వంటి ఇతర ప్రత్యేక రకాల క్రోమాటోగ్రాఫిక్ నిలువు వరుసలు వాస్తవ అనువర్తనాల్లో ఉన్నాయి. SFC), మొదలైనవి వివిధ రంగాలలో ముఖ్యమైన పాత్ర పోషిస్తాయి. నమూనా యొక్క నిర్మాణం మరియు లక్షణాలు, విభజన అవసరాలు మరియు ఇతర ప్రయోజనాల ప్రకారం నిర్దిష్ట రకం క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్ ఎంచుకోబడాలి.


పోస్ట్ సమయం: జూన్-14-2024