క్రోమాటోగ్రఫీ, "క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విశ్లేషణ", "క్రోమాటోగ్రఫీ" అని కూడా పిలుస్తారు, ఇది ఒక విభజన మరియు విశ్లేషణ పద్ధతి, ఇది విశ్లేషణాత్మక రసాయన శాస్త్రం, ఆర్గానిక్ కెమిస్ట్రీ, బయోకెమిస్ట్రీ మరియు ఇతర రంగాలలో చాలా విస్తృతమైన అనువర్తనాలను కలిగి ఉంది.
క్రోమాటోగ్రఫీ వ్యవస్థాపకుడు ఒక రష్యన్ వృక్షశాస్త్రజ్ఞుడు M.Tsvetter.1906లో, రష్యన్ వృక్షశాస్త్రజ్ఞుడు జ్వెట్టర్ తన ప్రయోగ ఫలితాలను ప్రచురించాడు: మొక్కల వర్ణాలను వేరు చేయడానికి, అతను కాల్షియం కార్బోనేట్ పౌడర్‌తో కూడిన గాజు గొట్టంలో మొక్కల వర్ణద్రవ్యం కలిగిన పెట్రోలియం ఈథర్ సారాన్ని పోసి పై నుండి క్రిందికి పెట్రోలియం ఈథర్‌తో తొలగించాడు.కాల్షియం కార్బోనేట్ కణాల ఉపరితలంపై వేర్వేరు వర్ణద్రవ్యం వేర్వేరు శోషణ సామర్థ్యాలను కలిగి ఉన్నందున, లీచింగ్ ప్రక్రియతో, వేర్వేరు వర్ణద్రవ్యాలు వేర్వేరు వేగంతో క్రిందికి కదులుతాయి, తద్వారా వివిధ రంగుల బ్యాండ్‌లను ఏర్పరుస్తాయి.వర్ణద్రవ్యం భాగాలు వేరు చేయబడ్డాయి.అతను ఈ విభజన పద్ధతికి క్రోమాటోగ్రఫీ అని పేరు పెట్టాడు.
మొక్క ఆకు వర్ణద్రవ్యం విభజన ప్రయోగం యొక్క స్కీమాటిక్ ప్రాతినిధ్యం
విభజన పద్ధతుల యొక్క నిరంతర అభివృద్ధితో, మరింత ఎక్కువ రంగులేని పదార్థాలు వేరుచేయడానికి వస్తువుగా మారాయి, క్రోమాటోగ్రఫీ కూడా క్రమంగా "రంగు" యొక్క అర్థాన్ని కోల్పోయింది, కానీ ఈ పేరు ఇప్పటికీ వాడుకలో ఉంది.
క్రోమాటోగ్రాఫిక్ వర్గీకరణ
క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క సారాంశం అనేది ఒక ప్రక్రియ, దీనిలో వేరు చేయవలసిన అణువులు స్థిరమైన దశ మరియు మొబైల్ దశల మధ్య విభజించబడ్డాయి మరియు సమతుల్యం చేయబడతాయి.రెండు దశల మధ్య వేర్వేరు పదార్థాలు వేర్వేరుగా విభజించబడ్డాయి, ఇది వాటిని మొబైల్ దశతో వేర్వేరు వేగంతో కదిలేలా చేస్తుంది.మొబైల్ దశ యొక్క కదలికతో, మిశ్రమంలోని వివిధ భాగాలు స్థిరమైన దశలో ఒకదానికొకటి వేరు చేయబడతాయి.మెకానిజంపై ఆధారపడి, దీనిని వివిధ వర్గాలుగా విభజించవచ్చు.
1, రెండు-దశల భౌతిక స్థితి వర్గీకరణ ప్రకారం
మొబైల్ దశ: గ్యాస్ క్రోమాటోగ్రఫీ, లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ, సూపర్ క్రిటికల్ ఫ్లూయిడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ
నిశ్చల దశ: గ్యాస్-ఘన, గ్యాస్-ద్రవ;ద్రవ-ఘన, ద్రవ-ద్రవ
2, స్థిర దశ వర్గీకరణ రూపం ప్రకారం
కాలమ్ క్రోమాటోగ్రఫీ: ప్యాక్డ్ కాలమ్ క్రోమాటోగ్రఫీ, క్యాపిల్లరీ కాలమ్ క్రోమాటోగ్రఫీ, మైక్రోప్యాక్డ్ కాలమ్ క్రోమాటోగ్రఫీ, ప్రిపరేటివ్ క్రోమాటోగ్రఫీ
ప్లేన్ క్రోమాటోగ్రఫీ: పేపర్ క్రోమాటోగ్రఫీ, థిన్ లేయర్ క్రోమాటోగ్రఫీ, పాలిమర్ మెమ్బ్రేన్ క్రోమాటోగ్రఫీ
3, విభజన విధానం ప్రకారం వర్గీకరించబడింది
అధిశోషణం క్రోమాటోగ్రఫీ: వివిధ భాగాలు వాటి శోషణ మరియు శోషణ సామర్థ్యాలను బట్టి వేరు చేయబడతాయి.
విభజన క్రోమాటోగ్రఫీ: వివిధ భాగాలు ద్రావకంలో వాటి ద్రావణీయతను బట్టి వేరు చేయబడతాయి
మాలిక్యులర్ ఎక్స్‌క్లూజన్ క్రోమాటోగ్రఫీ: విభజన యొక్క పరమాణు పరిమాణం యొక్క పరిమాణం ప్రకారం ln అయాన్ మార్పిడి క్రోమాటోగ్రఫీ: అయాన్-ఎక్స్‌ఛేంజ్ రెసిన్ విభజనకు అనుబంధం యొక్క విభిన్న భాగాలు
అనుబంధ క్రోమాటోగ్రఫీ: జీవ స్థూల కణాల మధ్య నిర్దిష్ట అనుబంధం ఉనికిని ఉపయోగించి వేరుచేయడం
కేశనాళిక ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్: కదలిక మరియు/లేదా విభజన ప్రవర్తనలో తేడాల ప్రకారం భాగాలు వేరు చేయబడ్డాయి
చిరల్ క్రోమాటోగ్రఫీ అనేది చిరల్ డ్రగ్స్ యొక్క విభజన మరియు విశ్లేషణ కోసం ఉపయోగించబడుతుంది, వీటిని మూడు వర్గాలుగా విభజించవచ్చు: చిరల్ డెరివేటైజేషన్ రియాజెంట్ పద్ధతి;చిరల్ మొబైల్ దశ సంకలిత పద్ధతి;చిరల్ స్టేషనరీ ఫేజ్ రిజల్యూషన్ పద్ధతి
క్రోమాటోగ్రఫీకి ప్రాథమిక పరిభాష
సమయానికి వ్యతిరేకంగా క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విభజనను గుర్తించిన తర్వాత భాగాల ప్రతిస్పందన సంకేతాలను ప్లాట్ చేయడం ద్వారా పొందిన వక్రతలను క్రోమాటోగ్రామ్‌లు అంటారు.
బేస్లైన్:కొన్ని క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పరిస్థితులలో, మొబైల్ దశ మాత్రమే డిటెక్టర్ సిస్టమ్ గుండా వెళుతున్నప్పుడు ఉత్పన్నమయ్యే సిగ్నల్ యొక్క వక్రరేఖను ఓట్ లైన్‌లో చూపిన విధంగా బేస్లైన్ అంటారు.ప్రయోగాత్మక స్థితి స్థిరంగా ఉన్నప్పుడు, బేస్లైన్ క్షితిజ సమాంతర అక్షానికి సమాంతర రేఖగా ఉంటుంది.బేస్లైన్ పరికరం యొక్క శబ్దాన్ని ప్రతిబింబిస్తుంది, ప్రధానంగా డిటెక్టర్, కాలక్రమేణా.
గరిష్ట ఎత్తు:AB 'లైన్‌లో చూపిన విధంగా h చే సూచించబడే క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పీక్ పాయింట్ మరియు బేస్లైన్ మధ్య నిలువు దూరం.
ప్రాంతం వెడల్పు:క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పీక్ యొక్క ప్రాంత వెడల్పు నేరుగా విభజన సామర్థ్యానికి సంబంధించినది.క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పీక్ వెడల్పును వివరించడానికి మూడు పద్ధతులు ఉన్నాయి: ప్రామాణిక విచలనం σ, పీక్ వెడల్పు W మరియు FWHM W1/2.
ప్రామాణిక విచలనం (σ):σ అనేది సాధారణ పంపిణీ వక్రరేఖపై రెండు ఇన్‌ఫ్లెక్షన్ పాయింట్‌ల మధ్య ఉన్న సగం దూరం, మరియు σ విలువ కాలమ్‌కు దూరంగా ఉన్న భాగాల వ్యాప్తి స్థాయిని సూచిస్తుంది.σ యొక్క పెద్ద విలువ, ప్రసరించే భాగాలు మరింత చెదరగొట్టబడతాయి మరియు విభజన ప్రభావం అధ్వాన్నంగా ఉంటుంది.దీనికి విరుద్ధంగా, ప్రసరించే భాగాలు కేంద్రీకృతమై ఉంటాయి మరియు విభజన ప్రభావం మంచిది.
గరిష్ట వెడల్పు W:క్రోమాటోగ్రాఫిక్ శిఖరం యొక్క రెండు వైపులా ఉన్న ఖండన బిందువులు టాంజెంట్ లైన్‌లుగా ఉపయోగించబడతాయి మరియు బేస్‌లైన్‌లోని అంతరాయాన్ని పీక్ వెడల్పు లేదా బేస్లైన్ వెడల్పు అని పిలుస్తారు, ఇది మూర్తి IJలో చూపిన విధంగా W వలె కూడా వ్యక్తీకరించబడుతుంది.సాధారణ పంపిణీ సూత్రం ప్రకారం, గరిష్ట వెడల్పు మరియు ప్రామాణిక విచలనం మధ్య సంబంధం W=4σగా నిరూపించబడుతుంది.
W1/2:GH దూరం కోసం చూపిన విధంగా, సగం గరిష్ట ఎత్తులో ఉన్న గరిష్ట వెడల్పును FWHM అంటారు.W1/2=2.355σ, W=1.699W1/2.
W1/2, W రెండూ σ నుండి ఉద్భవించాయి మరియు కాలమ్ ప్రభావాన్ని కొలవడానికి అదనంగా పీక్ ఏరియాలను లెక్కించడానికి ఉపయోగిస్తారు.FWHM కొలత మరింత సౌకర్యవంతంగా ఉంటుంది మరియు సాధారణంగా ఉపయోగించబడుతుంది.
సంక్షిప్త సారాంశం
క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పీక్ అవుట్‌ఫ్లో కర్వ్ నుండి, కింది లక్ష్యాలను సాధించవచ్చు:
a, క్రోమాటోగ్రాఫిక్ శిఖరాల నిలుపుదల విలువ ఆధారంగా గుణాత్మక విశ్లేషణ నిర్వహించబడింది
b, క్రోమాటోగ్రాఫిక్ శిఖరం యొక్క ప్రాంతం లేదా శిఖరం ఆధారంగా పరిమాణాత్మక విశ్లేషణ
C. క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పీక్ యొక్క నిలుపుదల విలువ మరియు గరిష్ట వెడల్పు ప్రకారం నిలువు వరుస యొక్క విభజన సామర్థ్యం మూల్యాంకనం చేయబడింది
క్రోమాటోగ్రఫీలో ఉన్న గణన సూత్రం
1. నిలుపుదల విలువ
నిలుపుదల విలువ అనేది కాలమ్‌లో నమూనా భాగం ఏ స్థాయిలో ఉంచబడిందో వివరించడానికి ఉపయోగించే పరామితి మరియు క్రోమాటోగ్రాఫిక్ క్యారెక్టరైజేషన్ యొక్క సూచికగా ఉపయోగించబడుతుంది.దీని ప్రాతినిధ్య పద్ధతి క్రింది విధంగా ఉంది:
నిలుపుదల సమయం tR
మరణ సమయంtM
నిలుపుదల సమయాన్ని సర్దుబాటు చేయండి tR'= టిఆర్-tM
(స్థిర దశలో గడిపిన మొత్తం సమయం)
నిలుపుదల వాల్యూమ్
VR=tR*F.(మొబైల్ దశ వేగంతో సంబంధం లేకుండా)
డెడ్ వాల్యూమ్
VM=tM*Fc
(ఇంజెక్టర్ నుండి డిటెక్టర్ వరకు ప్రవాహ మార్గంలో స్థిరమైన దశ ఆక్రమించబడని స్థలం)
నిలుపుదల వాల్యూమ్ VRని సర్దుబాటు చేయండి'= టి ఆర్*Fc
2. సాపేక్ష నిలుపుదల విలువ
రిలేటివ్ రిటెన్షన్ వాల్యూ, సెపరేషన్ ఫ్యాక్టర్, పార్టిషన్ కోఎఫీషియంట్ రేషియో లేదా రిలేటివ్ కెపాసిటీ ఫ్యాక్టర్ అని కూడా పిలుస్తారు, ఇది నిర్దిష్ట క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పరిస్థితులలో ప్రమాణం యొక్క సర్దుబాటు చేయబడిన నిలుపుదల సమయం (వాల్యూమ్)కి పరీక్షించిన భాగం యొక్క సర్దుబాటు చేయబడిన నిలుపుదల సమయం (వాల్యూమ్) నిష్పత్తి.
రిటెన్షన్ విలువలపై ఫ్లో రేట్ మరియు ఫిక్సేటివ్ లాస్ వంటి కొన్ని ఆపరేటింగ్ పరిస్థితుల ప్రభావాన్ని తొలగించడానికి సాపేక్ష నిలుపుదల విలువలు ఉపయోగించబడ్డాయి.సాపేక్ష నిలుపుదల విలువలోని ప్రమాణం పరీక్షించిన నమూనాలో ఒక భాగం కావచ్చు లేదా కృత్రిమంగా జోడించబడిన సమ్మేళనం కావచ్చు.
3. నిలుపుదల సూచిక
నిలుపుదల సూచిక అనేది స్థిరమైన పరిష్కారం Xలో పరీక్షించాల్సిన పదార్ధం i యొక్క నిలుపుదల సూచిక. రెండు n-అలన్‌లు రిఫరెన్స్ పదార్థాలుగా ఎంపిక చేయబడ్డాయి, వాటిలో ఒకటి N కార్బన్ సంఖ్య మరియు మరొకటి N+n.వాటి సర్దుబాటు చేయబడిన నిలుపుదల సమయం వరుసగా t 'r (N) మరియు t 'r (N+n), కాబట్టి i పరీక్షించవలసిన పదార్ధం యొక్క సర్దుబాటు చేయబడిన నిలుపుదల సమయం t 'r (i) ఖచ్చితంగా వాటి మధ్య ఉంటుంది, అనగా, t 'r (N).
నిలుపుదల సూచికను ఈ క్రింది విధంగా లెక్కించవచ్చు.
4. కెపాసిటీ ఫ్యాక్టర్ (కె)
సమతౌల్యం వద్ద, నిశ్చల దశ (లు)లోని ఒక భాగం యొక్క ద్రవ్యరాశిని మొబైల్ దశకు (m) నిష్పత్తిని సామర్థ్య కారకం అంటారు.సూత్రం క్రింది విధంగా ఉంది:
5、విభజన గుణకం (K) సమతౌల్యంలో, నిశ్చల దశ (లు)లో ఒక భాగం యొక్క ఏకాగ్రత మొబైల్ దశ (m)కి విభజన గుణకం అని పిలుస్తారు.సూత్రం క్రింది విధంగా ఉంది
K మరియు k మధ్య సంబంధం:
ఇది కాలమ్ రకం మరియు నిర్మాణం యొక్క దాని ముడి ముఖ్యమైన లక్షణాలను ప్రతిబింబిస్తుంది
సంక్షిప్త సారాంశం
నిలుపుదల విలువ మరియు సామర్థ్య కారకం మరియు విభజన గుణకం మధ్య సంబంధం:
క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విభజన అనేది స్థిర సాపేక్ష నమూనాలోని ప్రతి భాగం యొక్క అధిశోషణం లేదా రద్దు సామర్థ్యంలో వ్యత్యాసంపై ఆధారపడి ఉంటుంది, ఇది విభజన గుణకం K (లేదా కెపాసిటీ ఫ్యాక్టర్ k) విలువ పరిమాణం ద్వారా పరిమాణాత్మకంగా వ్యక్తీకరించబడుతుంది.
బలమైన శోషణం లేదా రద్దు సామర్థ్యం కలిగిన భాగాలు పెద్ద విభజన గుణకం (లేదా సామర్థ్య కారకం) మరియు దీర్ఘ నిలుపుదల సమయాన్ని కలిగి ఉంటాయి.దీనికి విరుద్ధంగా, బలహీనమైన శోషణం లేదా ద్రావణీయత కలిగిన భాగాలు చిన్న విభజన గుణకం మరియు తక్కువ నిలుపుదల సమయాన్ని కలిగి ఉంటాయి.
క్రోమాటోగ్రఫీ యొక్క ప్రాథమిక సిద్ధాంతం
1. ట్రే సిద్ధాంతం
(1) ముందుకు ఉంచండి -- థర్మోడైనమిక్ సిద్ధాంతం
ఇది మార్టిన్ మరియు సింజ్ ప్రతిపాదించిన టవర్ ప్లేట్ మోడల్‌తో ప్రారంభమైంది.
భిన్నమైన కాలమ్: వివిధ విభజన యొక్క మరిగే బిందువు ప్రకారం, అనేక సార్లు గ్యాస్-లిక్విడ్ సమతౌల్యం కోసం ట్రేలో.
నిలువు వరుస: భాగాలు రెండు దశల మధ్య బహుళ విభజనల ద్వారా సమతుల్యం చేయబడతాయి మరియు వేర్వేరు విభజన గుణకాల ప్రకారం వేరు చేయబడతాయి.
(2) పరికల్పన
(1) కాలమ్‌లో చాలా ట్రేలు ఉన్నాయి మరియు భాగాలు ట్రే విరామంలో (అంటే ట్రే ఎత్తు) పంపిణీ సమతౌల్యాన్ని త్వరగా చేరుకోగలవు.
(2) మొబైల్ దశ కాలమ్‌లోకి ప్రవేశిస్తుంది, నిరంతరంగా కాకుండా పల్సేటింగ్‌గా ఉంటుంది, అంటే ప్రతి పాసేజ్ కాలమ్ వాల్యూమ్.
(3) ప్రతి కాలమ్ ప్లేట్‌కు నమూనా జోడించబడినప్పుడు, కాలమ్ అక్షం వెంట నమూనా యొక్క వ్యాప్తిని విస్మరించవచ్చు.
(4) విభజన గుణకం అన్ని ట్రేలలో సమానంగా ఉంటుంది, భాగాలు మొత్తం స్వతంత్రంగా ఉంటుంది.అంటే, ప్రతి టాబన్‌పై విభజన గుణకం స్థిరంగా ఉంటుంది.
(3) సూత్రం
ట్రే సిద్ధాంతం యొక్క స్కీమాటిక్ రేఖాచిత్రం
యూనిట్ ద్రవ్యరాశి యొక్క ఒక భాగం, అనగా m=1 (ఉదాహరణకు, 1mg లేదా 1μg), సంఖ్య 0 ట్రేకి జోడించబడితే మరియు పంపిణీ సమతౌల్యం తర్వాత, ఎందుకంటే k=1, అవి ns=nm, nm=ns=0.5.
క్యారియర్ గ్యాస్ యొక్క ప్లేట్ వాల్యూమ్ (lΔV) పల్సేషన్ రూపంలో ప్లేట్ 0లోకి ప్రవేశించినప్పుడు, గ్యాస్ దశలో nm కాంపోనెంట్ ఉన్న క్యారియర్ గ్యాస్ ప్లేట్ 1కి నెట్టబడుతుంది. ఈ సమయంలో, ప్లేట్ 0 ద్రవ దశలో ఉన్న ns భాగం మరియు ప్లేట్ 1 యొక్క గ్యాస్ దశలోని nm భాగం రెండు దశల మధ్య పునఃపంపిణీ చేయబడుతుంది.కాబట్టి, ప్లేట్ 0లో ఉన్న మొత్తం భాగాల మొత్తం 0.5, దీనిలో గ్యాస్ మరియు ద్రవ దశలు ఒక్కొక్కటి 0.25, మరియు ప్లేట్ 1లో ఉన్న మొత్తం మొత్తం కూడా 0.5.గ్యాస్ మరియు ద్రవ దశలు కూడా 0.25.
కొత్త ప్లేట్ వాల్యూమ్ క్యారియర్ గ్యాస్ కాలమ్‌లోకి పల్సట్ చేయబడిన ప్రతిసారీ ఈ ప్రక్రియ పునరావృతమవుతుంది (క్రింద పట్టిక చూడండి).
(4) క్రోమాటోగ్రాఫిక్ అవుట్‌ఫ్లో కర్వ్ ఈక్వేషన్
σ అనేది ప్రామాణిక విచలనం, ఇది నిలుపుదల సమయం, C అనేది ఏ సమయంలోనైనా ఏకాగ్రత,
సి, ఇంజెక్షన్ ఏకాగ్రత, అంటే మొత్తం భాగాల మొత్తం (పీక్ ఏరియా A).
(5) కాలమ్ సామర్థ్యం పారామితులు
స్థిరమైన tR వద్ద, చిన్న W లేదా w 1/2 (అంటే, ఇరుకైన శిఖరం), సైద్ధాంతిక పలకల సంఖ్య పెద్దది n, సైద్ధాంతిక ప్లేట్ ఎత్తు చిన్నది మరియు నిలువు వరుస యొక్క విభజన సామర్థ్యం ఎక్కువగా ఉంటుంది.ప్రభావవంతమైన థియరీ ట్రే నెఫ్ విషయంలో కూడా ఇది వర్తిస్తుంది.అందువల్ల, ట్రేల యొక్క సైద్ధాంతిక సంఖ్య నిలువు వరుసల సామర్థ్యాన్ని అంచనా వేయడానికి ఒక సూచిక.
(5) లక్షణాలు మరియు లోపాలు
> ప్రయోజనాలు
ట్రే సిద్ధాంతం సెమీ-అనుభావికమైనది మరియు అవుట్‌ఫ్లో కర్వ్ ఆకారాన్ని వివరిస్తుంది
భాగాల విభజన మరియు విభజన ప్రక్రియలు వివరించబడ్డాయి
కాలమ్ యొక్క సామర్థ్యాన్ని అంచనా వేయడానికి ఒక సూచిక ప్రతిపాదించబడింది
> పరిమితులు
భాగాలు నిజంగా రెండు దశల్లో పంపిణీ సమతుల్యతను చేరుకోలేవు:
నిలువు వరుసలోని భాగాల రేఖాంశ వ్యాప్తిని విస్మరించలేము:
సామూహిక బదిలీ ప్రక్రియపై వివిధ గతి కారకాల ప్రభావం పరిగణించబడలేదు.
కాలమ్ ప్రభావం మరియు మొబైల్ దశ ప్రవాహ వేగం మధ్య సంబంధాన్ని వివరించలేము:
కాలమ్ ప్రభావాన్ని ప్రభావితం చేసే ప్రధాన అంశాలు ఏవి స్పష్టంగా లేవు
ఈ సమస్యలు రేటు సిద్ధాంతంలో సంతృప్తికరంగా పరిష్కరించబడ్డాయి.
2. రేటు సిద్ధాంతం
1956లో, డచ్ పండితుడు VanDeemter et al.ట్రే సిద్ధాంతం యొక్క భావనను గ్రహించి, ట్రే యొక్క ఎత్తును ప్రభావితం చేసే గతితార్కిక కారకాలను కలిపి, క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్రక్రియ యొక్క గతి సిద్ధాంతాన్ని ముందుకు తెచ్చారు - రేటు సిద్ధాంతం మరియు వాన్‌డీమ్టర్ సమీకరణాన్ని రూపొందించారు.ఇది క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్రక్రియను డైనమిక్ నాన్-ఈక్విలిబ్రియం ప్రక్రియగా పరిగణిస్తుంది మరియు గరిష్ట విస్తరణపై గతితార్కిక కారకాల ప్రభావాన్ని అధ్యయనం చేస్తుంది (అంటే, కాలమ్ ప్రభావం).
తరువాత, గిడ్డింగ్స్ మరియు స్నైడర్ మరియు ఇతరులు.VanDeemter సమీకరణం (తరువాత దీనిని గ్యాస్ క్రోమాటోగ్రఫీ రేటు సమీకరణం అని పిలుస్తారు) మరియు ద్రవ మరియు వాయువు మధ్య ఆస్తి వ్యత్యాసం ఆధారంగా ద్రవ క్రోమాటోగ్రఫీ రేటు సమీకరణాన్ని (అంటే గిడ్డింగ్స్ సమీకరణం) ప్రతిపాదించారు.
(1) వాన్ డీమ్టర్ సమీకరణం
ఎక్కడ: H: అనేది బోర్డు ఎత్తు
A: ఎడ్డీ డిఫ్యూజన్ టర్మ్ యొక్క గుణకం
B: పరమాణు వ్యాప్తి పదం యొక్క గుణకం
సి: మాస్ ట్రాన్స్‌ఫర్ రెసిస్టెన్స్ టర్మ్ యొక్క గుణకం
(2) గిడ్డింగ్స్ సమీకరణం
పరిమాణాత్మక మరియు గుణాత్మక విశ్లేషణ
(1) గుణాత్మక విశ్లేషణ
గుణాత్మక క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విశ్లేషణ అనేది ప్రతి క్రోమాటోగ్రాఫిక్ శిఖరం ద్వారా సూచించబడే సమ్మేళనాలను గుర్తించడం.వివిధ పదార్ధాలు నిర్దిష్ట క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పరిస్థితులలో ఖచ్చితమైన నిలుపుదల విలువలను కలిగి ఉంటాయి కాబట్టి, నిలుపుదల విలువను గుణాత్మక సూచికగా ఉపయోగించవచ్చు.వివిధ క్రోమాటోగ్రాఫిక్ గుణాత్మక పద్ధతులు ప్రస్తుతం నిలుపుదల విలువలపై ఆధారపడి ఉన్నాయి.
అయినప్పటికీ, ఒకే క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పరిస్థితులలో వేర్వేరు పదార్థాలు ఒకే విధమైన లేదా ఒకే విధమైన నిలుపుదల విలువలను కలిగి ఉండవచ్చు, అనగా నిలుపుదల విలువలు ప్రత్యేకమైనవి కావు.అందువల్ల కేవలం నిలుపుదల విలువల ఆధారంగా పూర్తిగా తెలియని నమూనాను వర్గీకరించడం కష్టం.నమూనా యొక్క మూలం, స్వభావం మరియు ఉద్దేశ్యాన్ని అర్థం చేసుకోవడం ఆధారంగా, నమూనా యొక్క కూర్పు యొక్క ప్రాథమిక తీర్పు చేయవచ్చు మరియు క్రోమాటోగ్రాఫిక్ శిఖరం ద్వారా సూచించబడిన సమ్మేళనాన్ని గుర్తించడానికి క్రింది పద్ధతులను ఉపయోగించవచ్చు.
1. స్వచ్ఛమైన పదార్ధాలను ఉపయోగించి గుణాత్మక నియంత్రణ
నిర్దిష్ట క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పరిస్థితులలో, తెలియని వ్యక్తికి నిర్వచించబడిన నిలుపుదల సమయం మాత్రమే ఉంటుంది.కాబట్టి, అదే క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పరిస్థితులలో తెలిసిన స్వచ్ఛమైన పదార్ధం యొక్క నిలుపుదల సమయాన్ని తెలియని పదార్ధం యొక్క నిలుపుదల సమయంతో పోల్చడం ద్వారా తెలియని దానిని గుణాత్మకంగా గుర్తించవచ్చు.రెండూ ఒకటే అయితే, తెలియని పదార్ధం తెలిసిన స్వచ్ఛమైన పదార్ధం కావచ్చు;లేకపోతే, తెలియనిది స్వచ్ఛమైన పదార్థం కాదు.
స్వచ్ఛమైన పదార్థ నియంత్రణ పద్ధతి తెలియని పదార్థానికి మాత్రమే వర్తిస్తుంది, దీని కూర్పు తెలిసినది, దీని కూర్పు సాపేక్షంగా సరళమైనది మరియు దాని స్వచ్ఛమైన పదార్ధం తెలిసినది.
2. సాపేక్ష నిలుపుదల విలువ పద్ధతి
సాపేక్ష నిలుపుదల విలువ α, భాగం i మరియు రిఫరెన్స్ మెటీరియల్స్ మధ్య సర్దుబాటును సూచిస్తుంది నిలుపుదల విలువల నిష్పత్తి:
ఇది స్థిరీకరణ మరియు కాలమ్ ఉష్ణోగ్రత యొక్క మార్పుతో మాత్రమే మారుతుంది మరియు ఇతర ఆపరేటింగ్ పరిస్థితులతో సంబంధం లేదు.
నిర్దిష్ట స్థిరమైన దశ మరియు కాలమ్ ఉష్ణోగ్రత వద్ద, కాంపోనెంట్ i మరియు రిఫరెన్స్ పదార్ధాల యొక్క సర్దుబాటు చేయబడిన నిలుపుదల విలువలు వరుసగా కొలుస్తారు మరియు పై సూత్రం ప్రకారం లెక్కించబడతాయి.పొందిన సాపేక్ష నిలుపుదల విలువలను సాహిత్యంలో సంబంధిత విలువలతో గుణాత్మకంగా పోల్చవచ్చు.
3, పీక్ ఎత్తు పద్ధతిని పెంచడానికి తెలిసిన పదార్ధాలను జోడించడం
తెలియని నమూనాలో అనేక భాగాలు ఉన్నప్పుడు, పొందిన క్రోమాటోగ్రాఫిక్ శిఖరాలు పై పద్ధతి ద్వారా సులభంగా గుర్తించబడలేనంత దట్టంగా ఉంటాయి లేదా తెలియని నమూనాను పేర్కొన్న అంశం విశ్లేషణ కోసం మాత్రమే ఉపయోగించినప్పుడు.
"మొదట తెలియని నమూనా యొక్క క్రోమాటోగ్రామ్ తయారు చేయబడుతుంది, ఆపై తెలియని నమూనాకు తెలిసిన పదార్థాన్ని జోడించడం ద్వారా తదుపరి క్రోమాటోగ్రామ్ పొందబడుతుంది."పెరిగిన శిఖర ఎత్తులతో కూడిన భాగాలు అటువంటి పదార్ధాలకు ప్రసిద్ధి చెందుతాయి.
4. ఇండెక్స్ యొక్క గుణాత్మక పద్ధతిని కొనసాగించండి
నిలుపుదల సూచిక అనేది ఫిక్సేటివ్‌లపై పదార్థాల నిలుపుదల ప్రవర్తనను సూచిస్తుంది మరియు ప్రస్తుతం GCలో అత్యంత విస్తృతంగా ఉపయోగించబడుతున్న మరియు అంతర్జాతీయంగా గుర్తింపు పొందిన గుణాత్మక సూచిక.ఇది మంచి పునరుత్పత్తి, ఏకరీతి ప్రమాణం మరియు చిన్న ఉష్ణోగ్రత గుణకం యొక్క ప్రయోజనాలను కలిగి ఉంది.
నిలుపుదల సూచిక స్థిరమైన దశ మరియు కాలమ్ ఉష్ణోగ్రత యొక్క లక్షణాలకు మాత్రమే సంబంధించినది, కానీ ఇతర ప్రయోగాత్మక పరిస్థితులకు కాదు.దీని ఖచ్చితత్వం మరియు పునరుత్పత్తి అద్భుతమైనవి.కాలమ్ ఉష్ణోగ్రత స్థిర దశకు సమానంగా ఉన్నంత వరకు, సాహిత్య విలువ గుర్తింపు కోసం వర్తించబడుతుంది మరియు పోలిక కోసం స్వచ్ఛమైన పదార్థాన్ని ఉపయోగించడం అవసరం లేదు.
(2) పరిమాణాత్మక విశ్లేషణ
క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పరిమాణానికి ఆధారం:
మిశ్రమ నమూనాలోని వంద భాగాలను కనుగొనడం పరిమాణాత్మక విశ్లేషణ యొక్క పని
పాక్షిక కంటెంట్.క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పరిమాణీకరణ క్రింది వాటిపై ఆధారపడి ఉంటుంది: ఆపరేటింగ్ పరిస్థితులు స్థిరంగా ఉన్నప్పుడు, ఇది
కొలిచిన భాగం యొక్క ద్రవ్యరాశి (లేదా ఏకాగ్రత) డిటెక్టర్ ఇచ్చిన ప్రతిస్పందన సిగ్నల్ ద్వారా నిర్ణయించబడుతుంది
ఇది అనుపాతంలో ఉంది.అవి:
క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పరిమాణానికి ఆధారం:
మిశ్రమ నమూనాలోని వంద భాగాలను కనుగొనడం పరిమాణాత్మక విశ్లేషణ యొక్క పని
పాక్షిక కంటెంట్.క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పరిమాణీకరణ క్రింది వాటిపై ఆధారపడి ఉంటుంది: ఆపరేటింగ్ పరిస్థితులు స్థిరంగా ఉన్నప్పుడు, ఇది
కొలిచిన భాగం యొక్క ద్రవ్యరాశి (లేదా ఏకాగ్రత) డిటెక్టర్ ఇచ్చిన ప్రతిస్పందన సిగ్నల్ ద్వారా నిర్ణయించబడుతుంది
ఇది అనుపాతంలో ఉంది.అవి:
1. పీక్ ఏరియా కొలత పద్ధతి
పీక్ ఏరియా అనేది క్రోమాటోగ్రామ్‌ల ద్వారా అందించబడిన ప్రాథమిక పరిమాణాత్మక డేటా, మరియు పీక్ ఏరియా కొలత యొక్క ఖచ్చితత్వం పరిమాణాత్మక ఫలితాలను నేరుగా ప్రభావితం చేస్తుంది.విభిన్న శిఖరా ఆకారాలతో క్రోమాటోగ్రాఫిక్ శిఖరాల కోసం వేర్వేరు కొలత పద్ధతులు ఉపయోగించబడ్డాయి.
పరిమాణాత్మక విశ్లేషణలో శీతాకాలం యొక్క ఖచ్చితమైన విలువను కనుగొనడం కష్టం:
ఒకవైపు సంపూర్ణ ఇంజెక్షన్ వాల్యూమ్‌ను ఖచ్చితంగా కొలవడంలో ఇబ్బంది కారణంగా: మరోవైపు
గరిష్ట ప్రాంతం క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పరిస్థితులపై ఆధారపడి ఉంటుంది మరియు విలువను కొలిచినప్పుడు క్రోమాటోగ్రాఫిక్ స్ట్రిప్ నిర్వహించబడాలి
అదే పని చేయడం సాధ్యం కాదు లేదా అనుకూలమైనది కాదు.మరియు మీరు దానిని సరిగ్గా పొందగలిగినప్పటికీ
ఖచ్చితమైన విలువ, ఏకీకృత ప్రమాణం లేనందున మరియు నేరుగా వర్తించదు.
2.క్వాంటిటేటివ్ కరెక్షన్ ఫ్యాక్టర్
పరిమాణాత్మక దిద్దుబాటు కారకం యొక్క నిర్వచనం: డిటెక్టర్‌లోకి ప్రవేశించే భాగాల మొత్తం (m)
దాని క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పీక్ ఏరియా (A) లేదా పీక్ ఎత్తు () నిష్పత్తి అనుపాత స్థిరాంకం (,
అనుపాత స్థిరాంకాన్ని కాంపోనెంట్ కోసం సంపూర్ణ దిద్దుబాటు కారకం అంటారు.
పరిమాణాత్మక విశ్లేషణలో శీతాకాలం యొక్క ఖచ్చితమైన విలువను కనుగొనడం కష్టం:
ఒకవైపు సంపూర్ణ ఇంజెక్షన్ వాల్యూమ్‌ను ఖచ్చితంగా కొలవడంలో ఇబ్బంది కారణంగా: మరోవైపు
గరిష్ట ప్రాంతం క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పరిస్థితులపై ఆధారపడి ఉంటుంది మరియు విలువను కొలిచినప్పుడు క్రోమాటోగ్రాఫిక్ స్ట్రిప్ నిర్వహించబడాలి
అదే పని చేయడం సాధ్యం కాదు లేదా అనుకూలమైనది కాదు.మరియు మీరు దానిని సరిగ్గా పొందగలిగినప్పటికీ
ఖచ్చితమైన విలువ, ఏకీకృత ప్రమాణం లేనందున మరియు నేరుగా వర్తించదు.
అంటే, ఒక కాంపోనెంట్ యొక్క సాపేక్ష దిద్దుబాటు కారకం భాగం మరియు రిఫరెన్స్ మెటీరియల్ s
సంపూర్ణ దిద్దుబాటు కారకాల నిష్పత్తి.
కాంపోనెంట్ యొక్క నాణ్యత ప్రమాణానికి వ్యతిరేకంగా ఉన్నప్పుడు సంబంధిత దిద్దుబాటు కారకం అని చూడవచ్చు.
పదార్ధం s సమానంగా ఉన్నప్పుడు, రిఫరెన్స్ మెటీరియల్ యొక్క గరిష్ట ప్రాంతం భాగం యొక్క గరిష్ట ప్రాంతం
బహుళ.కొన్ని భాగాలకు ద్రవ్యరాశి m మరియు పీక్ ఏరియా A ఉంటే, f'A సంఖ్య
విలువలు రిఫరెన్స్ మెటీరియల్ యొక్క గరిష్ట విస్తీర్ణానికి సమానంగా ఉంటాయి.వేరే పదాల్లో,
సంబంధిత దిద్దుబాటు కారకం ద్వారా, ప్రతి భాగం యొక్క గరిష్ట ప్రాంతాలను వేరు చేయవచ్చు
దాని ద్రవ్యరాశికి సమానమైన రిఫరెన్స్ మెటీరియల్ యొక్క గరిష్ట ప్రాంతానికి మార్చబడింది, ఆపై నిష్పత్తి
ప్రమాణం ఏకీకృతమైంది.కాబట్టి ప్రతి భాగం యొక్క శాతాన్ని గుర్తించడానికి ఇది సాధారణ పద్ధతి
పరిమాణం యొక్క ఆధారం.
సాపేక్ష దిద్దుబాటు కారకాన్ని పొందే విధానం: సాపేక్ష దిద్దుబాటు కారకం విలువలు ఉండటంతో మాత్రమే పోల్చబడ్డాయి
కొలత ప్రమాణం మరియు డిటెక్టర్ రకానికి సంబంధించినది, కానీ ఆపరేషన్ స్ట్రిప్‌కు సంబంధించినది
పర్వాలేదు.అందువల్ల, సాహిత్యంలోని సూచనల నుండి విలువలను తిరిగి పొందవచ్చు.టెక్స్ట్ ఉంటే
మీరు సమర్పణలో కావలసిన విలువను కనుగొనలేకపోతే, మీరు దానిని మీరే నిర్ణయించవచ్చు.నిర్ధారణ పద్ధతి
విధానం: కొలవబడిన పదార్ధం యొక్క నిర్దిష్ట మొత్తం పది ఎంపిక చేసిన రిఫరెన్స్ మెటీరియల్ → ఒక నిర్దిష్ట ఏకాగ్రతగా తయారు చేయబడింది
రెండు భాగాల క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పీక్ ఏరియాలు A మరియు As కొలుస్తారు.
అదీ ఫార్ములా.
3. పరిమాణాత్మక గణన పద్ధతి
(1) ఏరియా సాధారణీకరణ పద్ధతి
అన్ని పీక్-ఫ్రీ భిన్నాల కంటెంట్ మొత్తం పరిమాణీకరణ కోసం 100%గా లెక్కించబడుతుంది
పద్ధతిని సాధారణీకరణ అంటారు.దాని గణన సూత్రం క్రింది విధంగా ఉంది:
P,% అనేది పరీక్షించిన భాగాల యొక్క శాతం కంటెంట్;A1, A2... A n అనేది భాగం 1. 1~n యొక్క గరిష్ట ప్రాంతం;f'1, f'2... f'n అనేది 1 నుండి n వరకు ఉన్న భాగాలకు సంబంధిత దిద్దుబాటు కారకం.
(2) బాహ్య ప్రామాణిక పద్ధతి
నమూనాలో పరీక్షించాల్సిన భాగం యొక్క ప్రతిస్పందన సిగ్నల్ మరియు నియంత్రణగా పరీక్షించబడే స్వచ్ఛమైన భాగం మధ్య పరిమాణాత్మక పోలిక పద్ధతి.
(3) అంతర్గత ప్రామాణిక పద్ధతి
ఇంటర్నల్ స్టాండర్డ్ మెథడ్ అని పిలవబడేది, పరీక్షించిన పదార్ధం యొక్క ప్రామాణిక ద్రావణంలో మరియు నమూనా ద్రావణాన్ని అంతర్గత ప్రమాణంగా ఒక నిర్దిష్ట మొత్తంలో స్వచ్ఛమైన పదార్ధం జోడించి, ఆపై విశ్లేషించి మరియు నిర్ణయించే పద్ధతి.
(3) ప్రామాణిక కూడిక పద్ధతి
ప్రామాణిక జోడింపు పద్ధతి, అంతర్గత సంకలన పద్ధతి అని కూడా పిలుస్తారు, కొంత మొత్తాన్ని (△C) జోడించడం
పరీక్షా పదార్ధం యొక్క సూచన పరీక్షించవలసిన నమూనా ద్రావణానికి జోడించబడింది మరియు పరీక్ష పరీక్షకు జోడించబడింది
పదార్ధం తర్వాత నమూనా ద్రావణం యొక్క గరిష్ట స్థాయి అసలు నమూనా ద్రావణం కంటే ఎక్కువగా ఉంటుంది
నమూనా ద్రావణంలో పదార్ధం యొక్క ఏకాగ్రతను లెక్కించడానికి ప్రాంతం (△A) పెరుగుదల ఉపయోగించబడింది
కంటెంట్ (Cx)
గొడ్డలి అనేది అసలు నమూనాలో కొలవవలసిన పదార్ధం యొక్క గరిష్ట ప్రాంతం.
పోస్ట్ సమయం: మార్చి-27-2023